Técnica de edición de ácidos nucleicos para virus de la Influenza

A CRISPR activation screen identifies a pan-avian influenza virus inhibitory host factor

 Imagen obtenida de: https://en.m.wikipedia.org/wiki/Influenza_A_virus#/media/File%3AViruses-12-00504-g001.webp

Tipo de Edición: Ex vivo, somática, se realiza fuera del cuerpo (en cultivo celular) y no se modifica la línea germinal.

• Dirigido hacia: Gen B4GALNT2 (una glicosiltransferasa humana).
• Dirigido por: CRISPR/dCas9 (sistema CRISPR -Cas9 sin capacidad de corte, con activadores transcripcionales - SAM) usada para activar la transcripción de genes endógenos específicos como B4GALNT2.
• Órgano a tratar: Pulmón (células epiteliales pulmonares humanas A549) y células renales (MDCK).
• Vía de administración: Transducción viral (ex vivo) con lenticivirus portador del sistema CRISPR SAM o el gen B4GALNT2. 
• Resultados a corto plazo: Inhibición de la unión del virus a la célula y reducción >90% en infección por IAV en células modificadas.
• Resultados a mediano plazo: - Infección multicíclo altamente reducida y se observó menor citotoxicidad viral en todas las cepas aviares testeadas (H5, H7, H9, H10).
• Resultados a largo plazo: No se evaluaron efectos en modelos animales ni humanos, pero se sugiere potencial terapéutico en prevención de gripe aviar mediante terapia génica o activación farmacológica. 

Referencia Bibliográfica 

Heaton BE, Kennedy EM, Dumm RE, Harding AT, Sacco MT, Sachs D, et al. A CRISPR Activation Screen Identifies a Pan-avian Influenza Virus Inhibitory Host Factor. Cell Reports [Internet]. 1 de agosto de 2017;20(7):1503-12. Disponible en: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC5568676/

Terapia Regenerativa o Terapia Celular o Terapia con Stem Cells en otra enfermedad

 Terapia Celular en Fístulas perianales por enfermedad de Crohn

Imagen obtenida de: https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1137-66272006000500006

• Tipo de Stem Cell: Células madre mesenquimales alogénicas derivadas de tejido adiposo (MSC-AT).
• Método de obtención: Donantes adultos proporcionan tejido adiposo, posteriormente las células se aíslan, expanden en laboratorio y luego se congelan para su uso.
• Vía de administración: Inyección directa intralesional en la fístula perianal.
• Resultados: 

Corto plazo: 50% de pacientes lograron cierre completo de fístulas a las 52 semanas en comparación con placebo.
Mediano plazo: Beneficios sostenidos; muchos pacientes mantienen el cierre sin nuevas intervenciones quirúrgicas, reducción sostenida de la inflamación local, resultados positivos han sido respaldados en seguimiento hasta 2 años post - tratamiento.
Largo plazo: Aunque el producto fue retirado del mercado en la UE en dic 2024, en ensayos se siguió a pacientes hasta ≥3 años con remisión sostenida.

Referencias Bibliográficas

1.      Bacsur P, Shaham D, Serclova Z, Resál T, Farkas B, Sarlós P, et al. Evaluation of the Effectiveness and Safety of Mesenchymal Stem Cell Treatment in Fistulising Crohn’s Disease: An International Real‐Life Retrospective Multicentre Cohort Study. Alimentary Pharmacology & Therapeutics [Internet]. 28 de octubre de 2024; Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39468719/

2.      White I, Yanai H, Avni I, Slavin M, Naftali T, Tovi S, et al. Mesenchymal stem cell therapy for Crohn’s perianal fistula—a real‐world experience. Colorectal Disease [Internet]. 14 de diciembre de 2023;26(1):102-9. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38095303/

3.      Ciga MA, Oteiza F, Marzo J, Armendáriz P, De Miguel M, Ortiz H. Tratamiento de la enfermedad de Crohn perianal [Internet]. Disponible en: https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1137-66272006000500006

Evidencia con búsqueda de IA

ADN recombinante artificial (Hemofilia A) y ácido nucleico recombinante (bacterias simbiontes de insectos)

Hemofilia A

1. T (Título): Terapia génica para hemofilia A.
2. O (Objetivo): Disminuir el sangrado y dependencia de infusión de factor VIII.
3. G (Gen o secuencia a clonar): Gen humano de factor VIII sin dominio B.
4. ER (Enzima de restricción): No especificada (posible uso de enzimas como EcoRI, BamHI).
5. EL (Enzima ligasa): T4 DNA ligasa (presumiblemente).
6. V (Vector): Vector viral AAV recombinante.
7. CR (Célula receptora): Hepatocitos humanos.
8. MTG (Mecanismo de transferencia o inserción del gen): Inyección intravenosa del rAAV.
9. MIC (Métodos de identificación de clones): Niveles de factor VIII, tasa de sangrado, pruebas hepáticas, biopsias, PCR.
   

Imagen obtenida de: https://genotipia.com/dia-mundial-hemofilia/

Referencias Bibliográficas

1. Puetz J. Emergent data influences the risk/benefit assessment of hemophilia gene therapy using recombinant adeno-associated virus. Frontiers In Medicine [Internet]. 9 de noviembre de 2023;10. Disponible en: https://www.frontiersin.org/journals/medicine/articles/10.3389/fmed.2023.1256919/full
2. Genotipia C. Hemofilia: causa genética y herencia [Internet]. Genotipia. 2025. Disponible en: https://genotipia.com/dia-mundial-hemofilia/

Evidencia de búsqueda con IA

 Bacterias simbiontes de insectos

Las bacterias simbiontes de insectos intercambian fragmentos de ADN entre sí mediante recombinación homóloga y transferencia horizontal de genes (HGT). Estos mecanismos permiten que su genoma evite el deterioro por mutaciones acumuladas. La recombinación genética ocurre de manera natural y espontánea, sin manipulación externa, y permite mantener la funcionalidad de los genes a lo largo del tiempo. El estudio demuestra que esta recombinación mantiene los genomas "jóvenes". Es un caso auténtico de ácido nucleico recombinante en la naturaleza.

Imagen obtenida de: https://www.sabermas.umich.mx/archivo/articulos/590-numero-66/1178-simbiosis-insecto-bacteria-ante-el-cambio-climatico.html

Referencias Bibliográficas 

1. Russell SL, Pepper-Tunick E, Svedberg J, Byrne A, Castillo JR, Vollmers C, et al. Horizontal transmission and recombination maintain forever young bacterial symbiont genomes. PLoS Genetics [Internet]. 25 de agosto de 2020;16(8):e1008935. Disponible en: https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1008935
2. Simbiosis insecto-bacteria ante el cambio climático [Internet]. Disponible en: https://www.sabermas.umich.mx/archivo/articulos/590-numero-66/1178-simbiosis-insecto-bacteria-ante-el-cambio-climatico.html

Evidencia de búsqueda con IA

Técnica de hibridación y amplificación basada en secuencia para Covid 19 (SARS-CoV-2)

 Técnica: RT-PCR (Reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa)

Diagnóstico molecular está basado en la conversión del ARN viral en ADNc y su posterior amplificación usando sondas específicas (hibridación y amplificación basada en secuencia). Se utilizan genes diana como N, E, RdRp y ORF1ab para asegurar alta sensibilidad y especificidad. Esta técnica permite detectar bajas cargas virales. Las mutaciones del virus pueden afectar la eficacia de las sondas, lo que requiere actualizaciones continuas. Se usan alternativas como RT-LAMP y PCR digital. 

Imagen obtenida de: http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1794-24702020000300011

Referencias Bibliográficas

1. Dhar. Diagnostic assay and technology advancement for detecting SARS-COV-2 infections causing the COVID-19 pandemic. PubMed Central [Internet]. 2022;414(9):2903-34. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8872642/
2. López BOP, Orozco BR, León JJC. SARS-CoV-2: generalidades bioquímicas y métodos de diagnóstico. Nova [Internet]. 25 de septiembre de 2020;18(35):11-33. Disponible en: http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1794-24702020000300011

Búsqueda con ayuda de IA

Prueba PCR para Hepatitis B

El estudio se basó en el kit SUMASIGNAL VHB, se utilizó muestras de suero (positivas, negativas y controles de coinfección). Para la extracción del AN, se usó Proteinasa K (PCR cualitativa) y columnas QIAamp (PCR en tiempo real). Se empleó PCR cualitativa para la región preC/C y PCR en tiempo real (RCP‑TR con sonda TaqMan) dirigida al gen C. Los resultados fueron cualitativos (detección de VHB) y cuantitativos (carga viral con rango hasta 10⁸ UI/mL, límite de detección 16,41 UI/µL). El sistema SUMASIGNAL VHB demostró alta sensibilidad, especificidad, buena reproducibilidad y correlación con un kit comercial.

Video obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=Kyo1XlCIPFo

Referencias Bibliográficas

1.      Rodriguez Lay. Evaluación de una reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real simple y rápida para la cuantificación del ADN del virus de la hepatitis B. Revista Cubana de Medicina Tropical [Internet]. agosto de 2020;72(2). Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_abstract&pid=S0375-07602020000200005&lng=es&nrm=iso&tlng=es

2.      HiMedia Laboratories Pvt Ltd. MBPCR181 - Hi‐PCR® Hepatitis B Virus (HBV) Detection and Quantitation Probe PCR Kit. [Internet]. YouTube. 2025. Disponible en: https://www.youtube.com/watch?v=Kyo1XlCIPFo

Evidencia de uso de Google Académico

Técnica de secuenciación para la fibrosis quistica

obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=JuYVko-a1Qg

Se aplicó la técnica de secuenciación de próxima generación (NGS) para el cribado del gen CFTR, utilizando el kit Devyser CFTR NGS y el sistema Illumina MiSeq. Se detectó al menos un alelo alternativo en el 23 % de los sujetos y una frecuencia de portadores patogénicos de 1:12. La variante más común, p.(Phe508del), se encontró en el 37 % de los individuos mutados. Se identificaron tres nuevas variantes con posible efecto perjudicial mediante análisis bioinformático. La NGS demostró ser eficaz para detectar portadores asintomáticos y variabilidad genética del CFTR.

Imagen obtenida de:https://www.mayoclinic.org/es/diseases-conditions/cystic-fibrosis/symptoms-causes/syc-20353700#dialogId56413354

Referencias Bibliográficas 

1.   De Paolis E, Tilocca B, Lombardi C, De Bonis M, Concolino P, Onori ME, et al. Next-Generation Sequencing for Screening Analysis of Cystic Fibrosis: Spectrum and Novel Variants in a South–Central Italian Cohort. Genes [Internet]. 11 de agosto de 2023;14(8):1608. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37628659/

2.  Tópicos Nucleicos. Método Illumina de secuenciación masiva de DNA [Internet]. YouTube. 2021. Disponible en: https://www.youtube.com/watch?v=JuYVko-a1Qg

3. Fibrosis quística - Síntomas y causas - Mayo Clinic [Internet]. 2025. Disponible en: https://www.mayoclinic.org/es/diseases-conditions/cystic-fibrosis/symptoms-causes/syc-20353700#dialogId5641335

Búsqueda con ayuda de IA

Alteración de la epigenética en asma

Diversos marcadores genéticos y loci específicos están asociados con tipos de asma. ORMDL3/GSDMB se relacionan con el asma de inicio en la infancia, los polimorfismos (SNPs) en IL33 e IL1RL1 se asocian con el asma atópico. El gen TSLP ejerce un efecto protector frente al asma mediada por la respuesta inmunitaria TH2. La epigenética es una vía clave para entender la susceptibilidad al asma, regula la expresión génica sin modificar la secuencia del ADN. El mecanismo epigenético más investigado es la metilación del ADN, modificaciones de histonas y los microARNs (miR).

    Imagen obtenida de: https://www.tucuentasmucho.com/que-es-el-asma

Referencias Bibliográficas 

1. Ntontsi P, Photiades A, Zervas E, Xanthou G, Samitas K. Genetics and Epigenetics in Asthma. International Journal Of Molecular Sciences [Internet]. 27 de febrero de 2021;22(5):2412. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33673725/

2. ¿Qué es el asma? [Internet]. Tu Cuentas Mucho. 2021. Disponible en: https://www.tucuentasmucho.com/que-es-el-asma

Evidencia de la búsqueda con ayuda de IA