Técnica de hibridación y amplificación basada en secuencia para Covid 19 (SARS-CoV-2)

 Técnica: RT-PCR (Reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa)

Diagnóstico molecular está basado en la conversión del ARN viral en ADNc y su posterior amplificación usando sondas específicas (hibridación y amplificación basada en secuencia). Se utilizan genes diana como N, E, RdRp y ORF1ab para asegurar alta sensibilidad y especificidad. Esta técnica permite detectar bajas cargas virales. Las mutaciones del virus pueden afectar la eficacia de las sondas, lo que requiere actualizaciones continuas. Se usan alternativas como RT-LAMP y PCR digital. 

Imagen obtenida de: http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1794-24702020000300011

Referencias Bibliográficas

1. Dhar. Diagnostic assay and technology advancement for detecting SARS-COV-2 infections causing the COVID-19 pandemic. PubMed Central [Internet]. 2022;414(9):2903-34. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8872642/
2. López BOP, Orozco BR, León JJC. SARS-CoV-2: generalidades bioquímicas y métodos de diagnóstico. Nova [Internet]. 25 de septiembre de 2020;18(35):11-33. Disponible en: http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1794-24702020000300011

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Prueba PCR para Hepatitis B

El estudio se basó en el kit SUMASIGNAL VHB, se utilizó muestras de suero (positivas, negativas y controles de coinfección). Para la extracción del AN, se usó Proteinasa K (PCR cualitativa) y columnas QIAamp (PCR en tiempo real). Se empleó PCR cualitativa para la región preC/C y PCR en tiempo real (RCP‑TR con sonda TaqMan) dirigida al gen C. Los resultados fueron cualitativos (detección de VHB) y cuantitativos (carga viral con rango hasta 10⁸ UI/mL, límite de detección 16,41 UI/µL). El sistema SUMASIGNAL VHB demostró alta sensibilidad, especificidad, buena reproducibilidad y correlación con un kit comercial.

Video obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=Kyo1XlCIPFo

Referencias Bibliográficas

1.      Rodriguez Lay. Evaluación de una reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real simple y rápida para la cuantificación del ADN del virus de la hepatitis B. Revista Cubana de Medicina Tropical [Internet]. agosto de 2020;72(2). Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_abstract&pid=S0375-07602020000200005&lng=es&nrm=iso&tlng=es

2.      HiMedia Laboratories Pvt Ltd. MBPCR181 - Hi‐PCR® Hepatitis B Virus (HBV) Detection and Quantitation Probe PCR Kit. [Internet]. YouTube. 2025. Disponible en: https://www.youtube.com/watch?v=Kyo1XlCIPFo

Evidencia de uso de Google Académico

Técnica de secuenciación para la fibrosis quistica

obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=JuYVko-a1Qg

Se aplicó la técnica de secuenciación de próxima generación (NGS) para el cribado del gen CFTR, utilizando el kit Devyser CFTR NGS y el sistema Illumina MiSeq. Se detectó al menos un alelo alternativo en el 23 % de los sujetos y una frecuencia de portadores patogénicos de 1:12. La variante más común, p.(Phe508del), se encontró en el 37 % de los individuos mutados. Se identificaron tres nuevas variantes con posible efecto perjudicial mediante análisis bioinformático. La NGS demostró ser eficaz para detectar portadores asintomáticos y variabilidad genética del CFTR.

Imagen obtenida de:https://www.mayoclinic.org/es/diseases-conditions/cystic-fibrosis/symptoms-causes/syc-20353700#dialogId56413354

Referencias Bibliográficas 

1.   De Paolis E, Tilocca B, Lombardi C, De Bonis M, Concolino P, Onori ME, et al. Next-Generation Sequencing for Screening Analysis of Cystic Fibrosis: Spectrum and Novel Variants in a South–Central Italian Cohort. Genes [Internet]. 11 de agosto de 2023;14(8):1608. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37628659/

2.  Tópicos Nucleicos. Método Illumina de secuenciación masiva de DNA [Internet]. YouTube. 2021. Disponible en: https://www.youtube.com/watch?v=JuYVko-a1Qg

3. Fibrosis quística - Síntomas y causas - Mayo Clinic [Internet]. 2025. Disponible en: https://www.mayoclinic.org/es/diseases-conditions/cystic-fibrosis/symptoms-causes/syc-20353700#dialogId5641335

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